PRRSV M 蛋白细胞系的培育及其在细胞毒性T淋巴细胞检测方法中的应用
蒋文明
姜平
李玉峰
1.南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,南京,2100952.南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,南京,2100953.南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,南京,210095
摘要：目的 探讨PRRSV M基因在哺乳动物细胞NIH/3T3细胞中的表达,建立一种非放射性、简便易行的检测特异性细胞毒T淋巴细胞的方法.方法 应用RT-PCR扩增得到M基因并克隆入真核表达载体pcDNA3,构建成重组表达载体pcDNA3-M;将重组质粒转染至NIH/3T3细胞,G418筛选克隆;IFA检测M蛋白在转基因NIH/3T3细胞中的表达.用表达M蛋白的重组腺病毒rAd-M免疫小鼠,用表达M蛋白的NIH/3T3细胞和乳酸脱氢酶法检测PRRSV特异性细胞毒T淋巴细胞的杀伤效应. 结果 获得有G418抗性的NIH/3T3/M细胞克隆;IFA检测到有PRRSV M蛋白表达.重组腺病毒rAd-M免疫组可以诱发CTL应答,并明显高于wtAd和PBS对照组. 结论 培育成功一株能表达PRRSV M蛋白的细胞株NIH/3T3/M,可作为PRRSV CTL检测方法中的靶细胞,证明PRRSV M基因能够诱发特异性的细胞免疫.
关键词：PRRSVM真核表达CTL细胞免疫
分类号：R392.33(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(30471288)高等学校博士学科点专项科研基金(2003030712)教育部新世纪优秀人才支持计划(NCET-04-0502)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 222-224,228 )
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