小鼠HAX-1基因重组腺病毒载体的构建表达和鉴定
翟志芳1
郝飞1
刘志君2
钟白玉1
王鹰1
1.第三军医大学西南医院皮肤科,重庆,4000382.第三军医大学大坪医院野战外科研究所创伤实验室,重庆,400042
摘要：目的 构建小鼠Hax-1基因的重组腺病毒载体,以期进一步进行系统性红斑狼疮模型BXSB小鼠的体内实验研究.方法 用RT-PCR方法扩增小鼠全长Hax-1基因,经T/A克隆后,亚克隆至穿梭质粒pAdtrack-CMV上,在BJ5183细菌中和AdEasy-1进行同源重组,筛选阳性克隆,酶切、测序鉴定正确后,脂质体法转染AD-293细胞进行包装,扩增,氯化铯密度梯度离心纯化病毒并检测其滴度.RT-PCR鉴定重组腺病毒转染AD-293细胞后Hax-1的表达,同时进行野生型腺病毒的检测.结果 经酶切及测序证实Hax-1基因重组腺病毒载体构建成功.PCR检测转染后AD-293细胞内Hax-1基因水平的表达,且无野生型腺病毒的产生.结论 成功构建了含小鼠Hax-1基因的重组腺病毒载体,为探讨Hax-1的生物学功能奠定了基础.
关键词：Hax-1腺病毒细胞凋亡
分类号：R392(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(30671886)
论文发表日期：2006-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 694-697 )
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