基于可重复利用免疫磁珠的抗体检测方法的建立
郭慧芳1
张文红1
温冬青1
韩锋产1
张虎明2
阎小君1
1.第四军医大学全军基因诊断技术应用研究所,西安,7100322.西安美联生物科技有限公司,西安,710043
摘要:目的 基于可重复利用的免疫磁珠,建立一种简捷快速的特异性抗体检测方法 .方法 设计人类巨细胞病毒(human cytomegaloviruses,HCMV)PP150蛋白的抗原表位,并合成8分枝多聚抗原肽PP150-8MAPs.将PP150-8MAPs以共价结合形式包被于Dynabeads M-450 Tosylactivated磁珠表面,制备特异性免疫磁珠.用PP150-8MAPs免疫Balb/c小鼠制备抗此抗原表位的标准抗血清.应用免疫磁珠检测标准抗血清中的抗体,优化检测条件.在抗体检测反应结束后,洗脱抗体-二抗复合物,再生后的免疫磁珠重复用于标准抗血清样品的检测分析,并分析免疫磁珠可重复利用的次数.结果 制备免疫磁珠时,PP150-8MAPs的最佳包被量为100μg/mL,包被效率为79%.用PP150-8MAPs免疫小鼠后,得到的抗血清滴度可达到1:12 800.用免疫磁珠法检测小鼠标准抗血清,免疫磁珠可重复进行20次以上的检测分析.结论 基于酶联免疫检测方法 ,包被抗原的免疫磁珠可重复应用于血清样品中特异性抗体的检测分析.此实验为建立一种新的可重复检测的高效清样品中特异性抗体的检测分析.此实验为建立一种新的可重复检测的高效免疫磁珠抗体分析方法 奠定了基础,在基础研究与临床检测中具有广泛的应用前景.
关键词:抗原表位多聚抗原肽免疫磁珠
分类号:R392.11(医学免疫学)
论文发表日期:2006-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 577-579,583 )
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