人噬菌体抗体库的构建及人源性bFGF抗体的筛选
向军俭
汤伟佳
王宏
邓宁
杨红宇
1.暨南大学分子免疫学与抗体工程研究中心,广州,5106322.暨南大学分子免疫学与抗体工程研究中心,广州,5106323.暨南大学分子免疫学与抗体工程研究中心,广州,5106324.暨南大学分子免疫学与抗体工程研究中心,广州,5106325.暨南大学分子免疫学与抗体工程研究中心,广州,510632
摘要：目的选用含高效价碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)抗体的自身免疫病患者外周血淋巴细胞为材料,构建人噬菌体抗体库,并从中筛选抗bFGF抗体克隆.方法收集自身免疫病患者外周血,提取淋巴细胞总RNA后逆转录得到cDNA第一链,经PCR扩增重链Fd段和轻链基因,分别构建到噬菌粒载体pComb3中,将重组噬菌粒载体电转化大肠杆菌XL1-Blue,以辅助噬菌体VCSM13超感染,构建人噬菌体抗体库.经过3轮固相筛选,获得能结合bFGF的抗体克隆,并用ELISA进行进一步鉴定及筛选,获得具有高亲和力的抗bFGF噬菌体抗体克隆.结果构建的人源噬菌体抗体库库容为2.5×107,经3轮筛选获得具有bFGF特异性的Fab噬菌体抗体克隆.结论构建了人噬菌体Fab抗体库,并能够从中筛选出与bFGF特异结合的抗体克隆, 为bFGF抗体药物研究奠定基础.
关键词：bFGF抗体噬菌体展示抗体库
分类号：Q782(基因工程（遗传工程）)R392(医学免疫学)
资助基金：国家自然科学基金(30471607)教育部科学技术研究项目(105175)
论文发表日期：2006-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 451-454 )
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