人呼吸道合胞病毒F基因的克隆、真核表达与鉴定
袁媛
何金生
张梅
宋蔚
李栋梁
虞结梅
杨兵
1.安徽医科大学免疫学教研室,合肥,2300322.安徽医科大学免疫学教研室,合肥,2300323.安徽医科大学免疫学教研室,合肥,2300324.安徽医科大学免疫学教研室,合肥,2300325.安徽医科大学免疫学教研室,合肥,2300326.安徽医科大学免疫学教研室,合肥,2300327.安徽医科大学免疫学教研室,合肥,230032
摘要：目的克隆人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus,HRSV)F基因,构建F基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)/F,并进行表达和鉴定.方法根据编码F蛋白的基因序列设计引物,通过RT-PCR从感染HRSV的HEp-2细胞中扩增获得F蛋白的基因,然后克隆到pGEM-3zf载体中,序列测定正确后,将其亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+),行酶切鉴定,脂质体法转染COS-7细胞,应用Western blotting方法分析F基因表达情况.结果测序证实得到HRSV F基因序列,序列分析显示没有发生无义突变.转染COS-7细胞后,利用Western blotting方法检测到了F蛋白的特异性条带.结论成功克隆HRSV F基因,并在真核细胞中获得表达.
关键词：人呼吸道合胞病毒F基因真核表达
分类号：R392.11(医学免疫学)R34(基础医学)
资助基金：中国科学院项目（非规范项目）(30371320)安徽省自然科学基金(03043601)安徽省教育厅自然科学研究项目(2003ki182)
论文发表日期：2006-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 330-333 )
英文信息