重组人CD40胞外结构域在大肠杆菌中的表达和纯化鉴定
何贤辉1
徐丽慧2
刘毅1
杜丽蕊1
1.暨南大学,组织移植与免疫教育部重点实验室,广州,5106322.暨南大学,生物工程研究所,广州,510632
摘要：目的构建人CD40胞外结构域(exCD40)的原核表达载体,获得可溶性产物.方法以RT-PCR方法从人白细胞总RNA中扩增编码CD40胞外区的cDNA,构建羧基端融合His6标签的exCD40的原核表达载体,在大肠杆菌中表达,并对表达产物进行复性、纯化和鉴定.结果构建了exCD40的原核表达载体,并在大肠杆菌中获得高表达,M,为23 000,与理论大小相符,表达产物主要存在于包涵体中,经Ni2+-NTA柱上复性和纯化获得纯度达95%的可溶性exCD40蛋白,该蛋白能与细胞上的CD40L结合.结论从大肠杆菌中成功获得具有配基结合活性的可溶性exCD40蛋白.
关键词：CD40原核表达包涵体复性
分类号：R392.12(医学免疫学)Q78(基因工程（遗传工程）)
资助基金：中国科学院项目（非规范项目）(30371651)中国科学院项目（非规范项目）(30230350)科技部科研项目(G200057006)
论文发表日期：2006-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 195-198 )
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