CT-1及TTC的GST融合蛋白表达质粒的构建及表达
张伟
周跃
张正丰
李鑫兴
1.第三军医大学新桥医院骨科,重庆,4000372.第三军医大学新桥医院骨科,重庆,4000373.第三军医大学新桥医院骨科,重庆,4000374.第三军医大学新桥医院骨科,重庆,400037
摘要：目的构建心肌营养素-1(CT-1)和破伤风外毒素C片段(TTC)重组融合蛋白表达质粒.方法利用PCR、TA克隆等技术将CT-1及TTC基因克隆并连接到pGEX-4T-3,再做酶切鉴定、序列测定.在不同温度不同时间,通过IPTG诱导pGEX-CT-1/TTC在DH5α大肠杆菌中表达,SDS-PAGE分析表达量和可溶性蛋白GST-CT-1/TTC比例.结果构建的pGEX-CT-1/TTC酶切结果可见606bp、1 356bp大小的片段,与预期结果一致,测序结果表明序列正确.通过IPTG诱导,发现35℃诱导4 h,目的蛋白GST-CT-1/TTC表达量占全菌的1/5,可溶性蛋白与包涵体比为2/5.结论本实验成功构建了pGEX-CT-1/TTC重组融合质粒,为下一步将其用于脊髓损伤的治疗研究打下了基础.
关键词：心肌营养素-1破伤风外毒素质粒
分类号：R34(基础医学)
资助基金：中国科学院项目（非规范项目）(30472008)
论文发表日期：2006-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 101-103 )
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