色素上皮细胞衍生因子表达载体的构建
杨楠1
姚密河2
张桂荣3
杨翰仪3
1.解放军210医院眼科,大连,1160212.第二炮兵51基地531医院,吉林通化,1340023.吉林大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室,长春,130021
摘要：目的构建色素上皮细胞衍生因子(PEDF)的表达载体.方法从孕8周的胚胎绒毛中提取总RNA,经RT-PCR扩增,获得编码人PEDF的全基因序列,采用T-A克隆法,将PEDF基因克隆入PMD18-T中间载体并转化入大肠杆菌E.coliJM109中,提取重组质粒并酶切鉴定,将鉴定正确的质粒命名为PMD18-T/PEDF,DNA测序,测序正确后构建重组表达载体pET28a/PEDF,转化大肠杆菌E.coli DH5α并酶切鉴定.结果重组表达载体pET28a/PEDF在大肠杆菌E.coli DH5α中克隆表达.结论构建了PEDF重组表达载体pET28a/PEDF,为重组PEDF的进一步表达及纯化奠定了基础.
关键词：色素上皮细胞衍生因子克隆表达载体
分类号：Q785(基因工程（遗传工程）)
论文发表日期：2006-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 98-100,103 )
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