GST Pull-down实验鉴定NF-κB相互作用多肽
李生茂1
梁华平2
徐祥2
刘东擘2
1.第三军医大学大坪医院野战外科研究所一室,重庆,400042;武警青海总队医院外科,西宁,8100002.第三军医大学大坪医院野战外科研究所一室,重庆,400042
摘要:目的体外鉴定NF-κB相互作用多肽与p50和p65间的相互作用.方法首先构建GST-作用多肽融合蛋白的原核表达载体pET-42a/polypeptide及NF-κB50和p65亚基保守结构域的原核表达载体pET22b/p50和pET22b/p65,并在大肠杆菌E.coli BL-21中诱导表达,后进行GST pull-down实验验证多肽与NF-κBp50和p65的结合效应.结果经诱导表达获得了可溶性的GST-多肽融合蛋白和具有DNA结合活性的p50、p65蛋白,GST pull-down实验证实3条多肽与p50发生特异地相互作用.结论证实3条多肽在体外能与p50发生物理性的相互作用,这为获得靶向NF-κB的功能拮抗多肽工作奠定了基础.
关键词:GST Pull-down实验多肽NF-κB p50/p65蛋白间相互作用
分类号:Q503(一般性问题)Q51(蛋白质)Q58(生物体其他化学成分)
资助基金:国家自然科学基金(G1999054203)中国科学院项目(非规范项目)(300800009;30200270)
论文发表日期:2006-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 94-97 )
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免疫学杂志

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ISSN:1000-8861
年,卷(期):2006,22(1)
所属栏目:技术与方法