生物素化的HLA-A*2402-抗原肽复合物的制备
卢小玲
吴雄文
翁秀芳
李青
梁智辉
龚非力
1.华中科技大学同济医学院免疫学系,武汉,4300302.华中科技大学同济医学院免疫学系,武汉,4300303.华中科技大学同济医学院免疫学系,武汉,4300304.华中科技大学同济医学院免疫学系,武汉,4300305.华中科技大学同济医学院免疫学系,武汉,4300306.华中科技大学同济医学院免疫学系,武汉,430030
摘要：目的制备生物素化的HLA-A*2402-抗原肽复合物.方法将原核高效表达的sHLA-A*2402-BSP融合蛋白及β2m和HLA-A*2402限制性抗原肽EB病毒BRLF1蛋白中的九肽NH2-TYPVLEEMF-COOH进行稀释、复性、折叠,形成HLA-A*2402-抗原肽复合物单体,并在BirA酶作用下进行生物素化,使生物素结合到HLA-A*2402-抗原肽复合物中H链C端的BSP序列上形成生物素化的sHLA-A*2402-抗原肽复合物单体.利用特异性单克隆克体(W6/32和兔抗人β2微球蛋白抗体)及链霉亲合素进行ELISA和Western blot,检测稀释复性和生物素化的折叠产物.结果折叠复合物中,主要含有HLA-A*2402-肽复合物单体及β2m两种成分,其中HLA-A*2402-肽复合物单体可生物素化.结论成功制备出生物素化的HLA-A*2402-抗原肽复合物单体,为进一步构建四聚体及制备人工抗原提呈细胞奠定了基础.
关键词：HLA-A*2402-抗原肽复合物生物素化BirA酶
分类号：R392.11(医学免疫学)
资助基金：中国科学院项目（非规范项目）(30271201)科技部科研项目(2001CB510008)
论文发表日期：2006-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 78-81 )
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