Nogo-66融合蛋白的原核表达及鉴定
谢琳1
贺翔鸽1
苏踊跃2
陈渝2
Xin-fu ZHOU3
1.第三军医大学大坪医院眼科,重庆 4000422.第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,重庆 4000383.澳大利亚Flinders大学人类生理学系神经科学中心,阿德莱德,南澳大利亚 5001
摘要：目的原核表达轴突再生抑制蛋白Nogo-66,并对其进行鉴定.方法采用聚合酶链反应方法从含Nogo-66编码序列的质粒DNA中扩增出Nogo-66基因开放阅读框,构建原核表达载体,转化大肠杆菌,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,裂解细菌抽提蛋白,表达产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、Western免疫印迹鉴定.结果测序鉴定Nogo-66开放阅读框成功插入pET-46-EK/LIC质粒;重组质粒在大肠杆菌中成功表达大鼠Nogo-66蛋白,SDS-PAGE测定其相对分子质量(Mr)约7 000,Western Blot结果证实表达产物融合有聚组氨酸标签.结论应用原核表达系统成功表达了Nogo-66蛋白,为下一步制备Nogo-66蛋白疫苗及疫苗功能研究打下了基础.
关键词：Nogo-66原核表达融合蛋白
分类号：R318(医用一般科学)
资助基金：重庆市科委项目(CSTC)重庆市科委项目(2004BB5032)
论文发表日期：2005-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 256-258 )
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