携带野生型PTEN基因的腺病毒载体的构建
于林君1
祝善俊1
周裔忠1
田颖1
王江1
祝之明2
1.第三军医大学新桥医院心内科,重庆 4000372.第三军医大学大坪医院高血压内科,重庆 400042
摘要：目的构建携带野生型PTEN(Phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten)基因的腺病毒载体,为研究PTEN功能和作用机制提供手段.方法将野生型PTEN基因克隆入含有绿色荧光蛋白(Green fluorescence protein,GFP)基因的pAdTrack-CMV质粒,在含有pAdEasy-1病毒骨架的BJ5183大肠杆菌内进行同源重组;重组子通过脂质体介导转染AD293细胞,并在AD293细胞内包装为具有感染能力的病毒颗粒;通过反复感染扩增病毒以达到感染靶细胞的适当滴度,通过GFP表达来监控腺病毒扩增;Western blot检测靶细胞内PTEN蛋白的表达.结果感染腺病毒载体的AD293细胞表达GFP,随着时间逐渐增强,并且出现明显的细胞病变效应(Cytopathic effect,CPE),经过3轮扩增,病毒达到合适的滴度.受腺病毒感染心肌细胞内PTEN蛋白表达明显增高.结论成功构建了携带PTEN基因的腺病毒载体.
关键词：PTEN腺病毒重组载体
分类号：R541.6(心脏、血管（循环系）疾病)R394-33(医学遗传学)
资助基金：国家自然科学基金(30370584)
论文发表日期：2005-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 240-243 )
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