氯霉素乙酰基转移酶融合蛋白表达、纯化和鉴定
潘玉先
瘳志勇
郝卫
车小燕
1.第一军医大学珠江医院中心实验室,广东,广州,5102822.第一军医大学珠江医院中心实验室,广东,广州,5102823.第一军医大学珠江医院中心实验室,广东,广州,5102824.第一军医大学珠江医院中心实验室,广东,广州,510282
摘要：目的对氯霉素乙酰基转移酶(Chloramphenicol acetyltransferase,CAT)基因进行表达和纯化.方法通过PCR扩增编码CAT氨基酸序列的基因片断,并将之克隆入pGEX-2T载体.IPTG诱导蛋白融合表达,产物经琼脂糖亲和层析树脂纯化.免疫印迹鉴定纯化蛋白的抗原性.结果筛选得到的重组子诱导后表达相对分子质量约为52 600的CAT融合蛋白.树脂纯化及酶切后均得到高纯度的蛋白样品.纯化蛋白能与抗CAT抗体特异结合.结论本研究获得了CAT基因的融合表达蛋白,并对其完成纯化,为制备抗血清和抗体打下基础.
关键词：氯霉素乙酰基转移酶融合蛋白表达纯化鉴定
分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)
资助基金：广东省自然科学基金(020100)广东省自然科学基金(010637)
论文发表日期：2004-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 163-164,169 )
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