重组人ALR单克隆抗体的制备、鉴定和初步应用
王彦芳
焦艳晴
董爱华
耿娅
贾茜
1.华北制药集团新药研究开发有限责任公司,河北,石家庄,0500152.华北制药集团新药研究开发有限责任公司,河北,石家庄,0500153.华北制药集团新药研究开发有限责任公司,河北,石家庄,0500154.华北制药集团新药研究开发有限责任公司,河北,石家庄,0500155.华北制药集团新药研究开发有限责任公司,河北,石家庄,050015
摘要:目的制备抗重组人肝再生增强因子(ALR)的单克隆抗体(McAb).方法以基因重组人ALR二聚体(drhALR)为抗原,免疫Balb/c小鼠,制备单克隆抗体.用常规法制备抗ALR单体(mrhALR)多抗,建立夹心ELISA法测定ALR,初步确定ALR在小鼠组织的分布;用荧光免疫方法对胎鼠各组织进行ALR检测.结果筛选出3株稳定分泌抗drhALR的单抗杂交瘤细胞株,免疫球蛋白亚类分别为IgG1、IgG2a、IgG2b,特异性高,用于rhALR的免疫印迹及ELISA检测,可同时识别rhALR单体(mrhALR)和二聚体(drhALR);夹心ELISA法检测小鼠肝、肾、脾提取液ALR含量与鼠龄无关,各脏器的ALR含量不同,分别为肝0.36 μg/g、肾0.11 μg/g、脾0.05 μg/g;免疫荧光检测胎鼠,各器官有不同程度ALR的存在,无器官特异性.结论用drhALR为抗原制备的抗rhALR单克隆抗体,能够用于ALR的体内外免疫学检测,为rhALR及生化提取ALR的药理学研究及质量标准奠定了基础.
关键词:肝再生增强因子基因重组人ALR的二聚体单克隆抗体夹心ELISAALR的组织定位
分类号:R392.11(医学免疫学)
论文发表日期:2004-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 70-73 )
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