大容量人源单链抗体库构建中轻链重链可变区的连接
张志超
胡学军
包永明
安利佳
1.大连理工大学生物工程系,2.大连理工大学生物工程系,3.大连理工大学生物工程系,4.大连理工大学生物工程系,
摘要：目的单链抗体库的构建过程中,多采用轻链可变区(VL)、重链可变区(VH)、和linker 3条片段重叠延伸拼接法(SOE)进行连接.为了优化抗体库的多样性,提高效率,探讨了新的连接方法.方法通过不对称PCR制备单链DNA,再俩俩连接,得到单链抗体(ScFv)基因.分别将SOE法及不对称PCR法连接得到的ScFv基因与载体连接,转化E.coli TG1,构建抗体库.结果后者只需25次连接反应,78次电击转化,既可达到1×1010库容量.结论可以认为新方法具有更高的基因构建效率,并有效提高了抗体库的多样性.
关键词：单链抗体抗体库不对称PCR多样性
分类号：R392.11(医学免疫学)
论文发表日期：2001-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 472-474 )
英文信息