CD80-SEA重组毒素的设计及二级结构特征的预测
李增山1
隋延仿1
姜永强2
雷祚荣2
尚继栋2
1.第四军医大学病理学教研室肿瘤抗原肽实验室,陕西 西安 7100322.军事医学科学院微生物流行病学研究所,北京 100071
摘要:通过基因工程的手段所获得的各种重组毒素已在肿瘤
的基础和临床应用研究中显示出良好的前景。CD80-SEA重
组毒素可能会显著提高机体抗癌能力。但是,由于重组毒素
并非自然界所固有的天然蛋白,而且国际上至今对如何能设
计构建成人们所期望的理想的重组细胞因子融合蛋白还缺
乏具有指导性的理论[1],本研究所设计的CD80-Linker-SEA
融合基因在翻译后是否可达到预期的蛋白结构和生物活性,
是我们最为关注的问题。为此,我们利用计算机模拟了
CD80-Linker-SEA融合基因翻译后在二级结构水平上的一
些生物学特性,诸如柔性、抗原性、亲水性及表位等,以预测
融合基因及其接头设计的合理性。
1 材料和方法
1.1 材料 携带CD80cDNA和SEA基因各自的pBlue-
script IIKS(+)质粒为本室保存。
1.2 引物设计 按照参考文献[2]设计CD80上游引物
CCGCTCGAGGCCATGGGCCACACACGG、下游引物
CGGGATCCTCCACTACCTACAGGGCGTACACTTTCC。
按照参考文献[3]设计SEA上游引物GGGATCCGGTGG-
AGGTAGCGAGAAAAGCGAAGAAA、下游引物
CCGCTCG-AGTTAACTTGTATATAAATAT,两片段相
连的Linker部分已设计入引物内。上述引物均为赛百盛公
司合成。
1.3 pLXSN-CD80-SEA重组体的构建 PCR扩增CD80和
SEA片段后,均以BamH I、Xhol I双酶切后,与经Xhol I
酶切的逆转录真核表达载体pLXSN行连接反应。
关键词:重组CD80staphylococcal enterotoxin A(SEA)计算机模拟
分类号:R392.11(医学免疫学)
资助基金:国家自然科学基金(39770827)
论文发表日期:2000-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:1( 471 )
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