miR-30a-5p靶向E2F7阻滞A549细胞周期并抑制其增殖
鲍祯
乔亚红
河南省胸科医院呼吸与危重症医学科,河南郑州 450000
摘要：目的 探究miR-30a-5p靶向E2F7调控非小细胞肺癌细胞周期和增殖的机制.方法 通过荧光定量(qRT-PCR)验证miR-30a-5p在非小细胞肺癌A549细胞与人正常肺上皮细胞BEAS-2B中的相对表达水平.在线软件预测了 miR-30a-5p的靶基因及其靶向结合位点,双荧光素酶报告基因实验进一步验证miR-30a-5p和E2F7 mRNA 3'UTR区域的靶向关系.其次在A549细胞中分别转染miR-30a-5p模拟物(miR-30a-5p mimics)和miR-30a-5p抑制剂(miR-30a-5p inhibitor),应用CCK-8细胞计数试剂盒检测A549细胞增殖情况,流式细胞术检测A549细胞凋亡和细胞周期.qRT-PCR和免疫印迹检测细胞周期相关基因和肺腺癌相关基因的mRNA和蛋白表达水平.结果 miR-30a-5p在A549细胞中表达水平低于BEAS-2B,且miR-30a-5p靶向结合与E2F7 mRNA 3'UTR 514-520位点,抑制E2F7表达.转染miR-30a-5p mimics抑制A549细胞增殖,并促进A549凋亡.将A549细胞周期阻滞在G1期.调控肺腺癌相关基因TFDP3、CDK1、E2F8、CCNA2和CDC6的mRNA和蛋白表达水平.结论 非小细胞肺癌A549细胞中miR-30a-5p通过靶向负调控E2F7的表达,调控TFDP3、CDK1、E2F8、CCNA2和CDC6的mRNA和蛋白表达,抑制A549细胞增殖和细胞周期.
关键词：非小细胞肺癌miR-30a-5pE2F7基因表达细胞周期凋亡
分类号：R734(呼吸系肿瘤)
论文发表日期：2024-09-15
在线出版日期：2026-09-12（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 3106-3113 )
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