匹莫齐特对脂多糖诱导RAW264.7细胞诱导型一氧化氮合成酶表达的调控及其作用机制
刘佳
郑州大学第五附属医院输血科,河南郑州 450052
摘要：目的 运用脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞株,探究匹莫齐特(Pimozide)对一氧化氮和诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)合成的影响和作用机制.方法 用含10％胎牛血清、100 U·mL-1的青链霉素DMEM培养液将RAW264.7细胞稀释为每孔2 × 105个接种于24孔板中进行培养,分为空白对照组(仅含DMEM培养液+RAW264.7细胞)、Pimozide 组(仅含 RAW264.7 细胞和 10 μmol·L-1 Pimozide 培养液)、LPS 诱导(LPS 1 mg·L-1)组(LPS+RAW264.7细胞)、药物处理组[含细胞和不同浓度药物,包括Pimozide低(LPS+2.5 μmol·L-1)、中(LPS+5 μmol·L-1)、高(LPS+10 μmol·L-1)组].各组培养上清液中一氧化氮水平测定采用Griess法进行检测.采用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)法和免疫蛋白印迹法分别检测iNOS mRNA表达水平和iNOS和磷酸化的信号传导及转录激活因子通路-5的蛋白表达相对水平.结果 用含10％胎牛血清、100 U·mL-1的青链霉素DMEM培养液培养RAW264.7细胞24 h后,各组培养上清液一氧化氮表达水平差异有统计学意义(F=25.69,P＜0.05);Pimozide低(LPS+2.5 μmol·L-1)、中(LPS+5 μmol·L-1)、高(LPS+10 μmol·L-1)组一氧化氮释放的抑制率差异有统计学意义(F=132.49,P＜0.05).各组iNOS mRNA和蛋白水平表达差异有统计学意义(F=118.59和23.37,P＜0.05),同时发现各组磷酸化的信号传导及转录激活因子通路-5/信号传导及转录激活因子通路-5比值差异有统计学意义(F=12.07,P＜0.05).结论 Pimozide可抑制RAW264.7细胞中iNOS表达和一氧化氮的生成,其作用机制可能与抑制磷酸化的信号传导及转录激活因子通路-5的生成相关.
关键词：匹莫齐特脂多糖RAW264.7细胞信号传导及转录激活因子通路诱导型一氧化氮合成酶
分类号：R965(药理学)
论文发表日期：2024-04-15
在线出版日期：2026-09-12（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 1175-1180 )
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