HAX-1通过调控MDM2/SMAD3通路对TGF-β1诱导的特发性肺间质纤维化的作用机制
高崴崴
刘待见
张晓萍
冯青青
刘颖
郑州大学第二附属医院呼吸与危重症医学科,河南郑州 450000
摘要：目的 探讨造血细胞特异性蛋白1相关蛋白X-1(HAX-1)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的特发性肺间质纤维化的作用及机制.方法 将A549细胞分为对照组(无处理)、TGF-β1组(用5μg·L-1的TGF-β1诱导48 h)、NC si组(用阴性对照siRNA转染细胞,再用5 μg·L-1的TGF-β1诱导48 h)、HAX-1 si组(用HAX-1 siRNA转染细胞,再用 5 μg·L-1的TGF-β1 诱导48 h)、HAX-1 si+pcDNA3.1 组(用 HAX-1 siRNA 转染细胞,再用 pcDNA3.1 空质粒转染细胞,再用5 μg·L-1的TGF-β1诱导48 h)、HAX-1 si+MDM2组(用HAX-1 siRNA转染细胞,再用MDM2过表达质粒pcDNA3.1-MDM2转染细胞,再用5μg·L-1的TGF-β1诱导48 h)、HAX-1 si+MDM2+DMSO组(用HAX-1 siRNA转染细胞,再用MDM2过表达质粒pcDNA3.1-MDM2转染细胞,向细胞培养液中加入溶剂DMSO处理细胞 30 min,再用 5 μg·L-1的 TGF-β1 诱导 48 h)、HAX-1 si+MDM2+SIS3 组(用 HAX-1 siRNA 转染细胞,再用MDM2过表达质粒pcDNA3.1-MDM2转染细胞,用终浓度为1μmol·L-1溶于DMSO的SIS3处理细胞30 min,再用5 μg·L-1 的TGF-β1诱导48 h).相应处理结束后,采用倒置相差显微镜观察细胞形态变化;Western blot检测HAX-1、鼠双微体基因2(MDM2)、SMAD3、p-SMAD3、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原α1链(COL1A1)蛋白表达水平.结果 TGF-β1诱导细胞后,细胞由鹅卵石形或多角形转变为梭形、纺锤形,E-cadherin蛋白表达降低(P＜0.05),HAX-1、α-SMA和COL1A1蛋白表达升高(P＜0.05).干扰HAX-1可提高E-cadherin蛋白表达(P＜0.05),抑制MDM2、p-SMAD3、α-SMA和COL1A1蛋白表达(P＜0.05),并且细胞形态又转变为鹅卵石形或多角形.MDM2过表达抵消HAX-1干扰对p-SMAD3、E-cadherin、α-SMA和COL1A1蛋白表达的影响(P＜0.05).SMAD3抑制剂SIS3处理后细胞形态又转变为鹅卵石形或多角形,E-cadherin蛋白表达升高(P＜0.05),α-SMA和COL1A1蛋白表达下降(P＜0.05).结论 HAX-1在TGF-β1诱导的A549细胞中高表达,HAX-1敲低可通过MDM2/SMAD3通路抑制TGF-β1诱导的肺泡细胞纤维化过程.
关键词：特发性肺间质纤维化造血细胞特异性蛋白1相关蛋白X-1转化生长因子β1鼠双微体基因2SMAD3
分类号：R563.9(呼吸系及胸部疾病)
资助基金：河南省医学科技攻关计划项目(LHGJ20200413)
论文发表日期：2023-06-30
在线出版日期：2026-09-12（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 2113-2118 )
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