嵌合抗原受体修饰T细胞免疫治疗食管癌的实验研究
丁辉
谢甲贝
李修岭
韩双印
周炳喜
河南省人民医院 消化内科,河南 郑州 450003
摘要：目的 观察嵌合抗原受体修饰T细胞(CAR-T)对人食管癌细胞EC109的体内外抗肿瘤作用.方法 以表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)为分子靶点、EC109-EGFRvⅢ为靶细胞,将二代CAR表达框克隆入慢病毒表达载体中,制备慢病毒并转染人外周血T细胞,采用乳酸脱氢酶(LDH)活性及干扰素γ(IFN-γ)等方法检测体外抗肿瘤作用,通过NSG小鼠移植瘤模型观察体内抗肿瘤作用.结果 表达质粒pEGFRvⅢ/CAR经限制性内切酶片段分析、基因检测及NCBI/Blast同源性分析确认各功能单位核苷酸序列准确无误、基因片段连接正确,流式细胞术检测慢病毒转染后T细胞EGFRvⅢ/CAR表达率为82％.效应细胞(EGFRvⅢ/CAR-T)和靶细胞(EC109-EGFRvⅢ)混合培养,LDH细胞毒性检测结果显示靶细胞裂解死亡与效/靶比呈正相关(E:T为5:1、10:1、20:1、40:1),IFN-γ在E:T为5:1时与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01).NSG小鼠皮下移植模型提示EGFRvⅢ/CAR-T对移植瘤有肿瘤抑制作用.结论 体外和体内实验显示CAR-T细胞对EC109-EGFRvⅢ有靶向杀伤作用,这为食管癌细胞免疫治疗提供了实验依据和研究基础.
关键词：食管癌CAR-T免疫治疗EGFRvⅢ
分类号：R551.2(血液及淋巴系疾病)
资助基金：国家自然科学基金(81772670)
论文发表日期：2023-04-30
在线出版日期：2026-09-12（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 1396-1399 )
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