建立体外星形胶质细胞活化模型的优化方法
秦洁1
邱星辰1
龚光明2
郑怀信2
轩小燕2
王鹏2
郭艺楠1
雷蕾1
1.郑州大学第一附属医院 神经内科,河南 郑州 4500002.郑州大学基础医学院 微生物学与免疫学系,河南 郑州 450000
摘要：目的 使用脂多糖(LPS)、白介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α),在不同的培养液类型、反应时间、反应浓度、反应条件下作用于星形胶质细胞系(C8-D1 A),建立一种稳定的可用于体外实验的星形胶质细胞活化模型.方法 将C8-D1 A细胞系进行细胞传代、培养,接种于培养瓶.分别在无血清基础培养液与完全培养液中培养细胞,加入不同浓度的LPS、IL-1β和TNF-α,培养不同时间后通过Western blot或荧光定量PCR检测胶质纤维酸性蛋白因子(GFAP)的表达水平,以确定活化星形胶质细胞的最佳培养条件.结果 完全培养液中,不同浓度的LPS干预C8-D1 A细胞系48 h后,各组GFAP表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05).基础培养液中,1 mg·L-1 LPS干预下,随时间延长GFAP表达水平逐渐升高,且48 h组、72 h组与空白组GFAP表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05).基础培养液中,1 mg·L-1 LPS组及5 mg·L-1 LPS组GFAP表达水平高于空白组,差异有统计学意义(P<0.05).基础培养液中,1 mg·L-1 LPS组、10μg·L-1 IL-1β联合10μg·L-1 TNF-α组GFAP表达水平高于空白组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 1 mg·L-1 LPS或10μg·L-1 IL-1β联合10μg·L-1 TNF-α在无血清的基础培养液中干预星形胶质细胞系48 h,可获得星形胶质细胞体外活化模型.
关键词：星形胶质细胞炎症因子脂多糖模型优化
分类号：R331(人体生理学)
资助基金：国家自然科学基金(81870919)河南省自然科学基金(182300410352)
论文发表日期：2022-09-15
在线出版日期：2026-09-12（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 3073-3077 )
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