亲和层析纯化重组中性粒细胞激活蛋白
丁亚骏
何璐云
王亚楠
张亚娟
康巧珍
1.郑州大学生物工程系 河南郑州4500012.郑州大学生物工程系 河南郑州4500013.郑州大学生物工程系 河南郑州4500014.郑州大学生物工程系 河南郑州4500015.郑州大学生物工程系 河南郑州450001
摘要：目的:直链淀粉树脂亲和层析法分离纯化重组麦芽糖结合蛋白-中性粒细胞激活蛋白(recombinant maltose-binding protein-neutrophil-activating protein,rMBP-NAP).用于支气管哮喘模型小鼠进行免疫调节实验.方法:IPTG诱导基因工程菌E.coli TB1 (pMAL-c2X-nap)表达rMBP-NAP,离心收获细胞,过柱缓冲液重悬菌体并超声破碎,再次离心取上清和沉淀,SDS-PAGE分析rMBP-NAP可溶性；直链淀粉树脂亲和层析法分离纯化rMBP-NAP;SDS-PAGE凝胶扫描分析纯化后rMBP-NAP纯度；蛋白定量试剂盒测定rMBP-NAP浓度.结果:IPTG诱导工程菌表达的rMBP-NAP主要以可溶性形式存在于超声上清中,相对分子质量约为57kD,与预期结果一致；亲和层析法纯化rMBP-NAP纯度可达96.5％,浓度可达0.625g/L.结论:用直链淀粉树脂亲和层析法,可纯化得到高纯度、高浓度的融合蛋白rMBP-NAP.
关键词：亲和层析融合蛋白麦芽糖结合蛋白中性粒细胞激活蛋白
分类号：R392(医学免疫学)
资助基金：全国大学生创新创业训练计划项目(121045944)国家科技重大专项(2012ZX09103-301-022)
论文发表日期：2012-01-01
在线出版日期：2026-09-12（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 271-273 )
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