人sCR1克隆、真核和原核表达纯化及其多克隆抗体制备
王广兰
宫璀璀
刘亚利
张长远
刘珊
王文丽
戴启宇
1.解放军第153中心医院济南军区检验中心,河南郑州,4500422.解放军第153中心医院济南军区检验中心,河南郑州,4500423.解放军第153中心医院济南军区检验中心,河南郑州,4500424.解放军第153中心医院济南军区检验中心,河南郑州,4500425.解放军第153中心医院济南军区检验中心,河南郑州,4500426.解放军第153中心医院济南军区检验中心,河南郑州,4500427.解放军第153中心医院济南军区检验中心,河南郑州,450042
摘要：目的:原核表达人sCR1分子胞外区及其多克隆抗体制备.方法:提取人总RNA进行RT-PCR扩增合成cDNA,以cDNA为模板,构建重组表达质粒pET28a-sCR1.转化大肠杆菌中,用IPTG诱导表达重组人sCR1融合蛋白,将其作为免疫原制备兔多抗.采用ELISA法检测抗体效价,经免疫亲和层析法纯化后,进行SDS-PAGE鉴定分析.结果:在原核细胞中高效表达人sCR1融合蛋白,经纯化复性后作为免疫原,免疫家兔,获得了高效价及特异性的兔抗人sCR1多克隆抗体,可特异地识别人sCR1蛋白.结论:纯化复性后的sCR1融合蛋白作为抗原免疫家兔,有较好的抗原性和免疫原性,成功地制备出兔抗人sCR1多克隆抗体,为进一步大量表达纯化人sCR1融合蛋白与临床免疫学检测方法的建立,也为深入研究sCR1生物学功能奠定了基础.
关键词：原核表达多克隆抗体补体受体1型免疫亲和层析纯化
分类号：R392(医学免疫学)
资助基金：济南军区重点资助项目(02227)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2026-09-12（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 289-293 )
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