人表皮生长因子真核细胞缓释型滴眼剂的基因治疗研究
鲍玉洲
张艳敏
李建新
1.河南省眼科研究所分子生物室,河南郑州,4500032.河南省眼科研究所分子生物室,河南郑州,4500033.河南省眼科研究所分子生物室,河南郑州,450003
摘要：目的:构建人表皮生长因子的真核表达载体,探讨用人表皮生长凶子对角膜损伤治疗的可行性.方法:采用基因重组技术将人表皮生长因子基因插入pcDNA.3.1真核表达穿梭质粒,用脂质体包裹制成人表皮生长因子基因缓释型滴眼剂,滴眼治疗家兔角膜碱烧伤.结果;将hEGF-pcDNA3.1重组体进行限制性酶切及PCR扩增可见目的片段;基因治疗组在模型治疗后第7 d,角膜荧光着色变浅,溃疡面变小;第18～21 d溃疡面消失;在基因治疗后第1至28 d,从角膜组织中均可检测出hEGF mRNA,基因治疗组蛋白质表达水平明显升高,第7d达高峰,为224.286 ng/g角膜湿重,持续可表达3周以上;基因治疗眼角膜免疫组织化学染色可在角膜细胞内见hEGF蛋白质表达,第7d达高峰,细胞转染率高达95%以上,并可持续表达3周以上.结论:用poDNA.3.1真核表达穿梭质粒作为载体,携带人表皮生长因子基因,用脂质体包裹后制成缓释型滴眼液,以滴眼的方式给药转染角膜,可达到极高的转染率,具有良好的应用前景.
关键词：人表皮生长因子角膜基因克隆基因治疗
分类号：R776(晶状体与玻璃体疾病)
资助基金：河南省科技发展计划(0141163216)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2026-09-12（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 7-11 )
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