幽门螺杆菌融合蛋白HspA-UreB在pMAL-C2x中的表达与免疫学活性研究
代丽萍1
段广才1
范清堂2
张荣光2
1.郑州大学公共卫生学院流行病学教研室,河南,郑州,450052;郑州大学河南省分子医学重点学科开放实验室,河南郑州,4500522.郑州大学河南省分子医学重点学科开放实验室,河南郑州,450052
摘要：目的:在pMAL-C2x中表达幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)融合蛋白HspA-UreB,探索其免疫学活性,为Hp基因工程疫苗的研究奠定基础.方法:从重组质粒pNHA27和pNUB27中纯化回收hspA和ureB基因片段,并以hspA-ureB的顺序连接后插入原核表达载体pMAL-C2x中,表达麦芽糖结合蛋白(MBP)与HspA-UreB的融合蛋白.采用亲和层析法纯化融合蛋白MBP-HspA-UreB,并辅以弗氏佐剂皮下免疫小鼠,蛋白印迹法对免疫小鼠血清进行检测.结果:特异PCR法和酶切鉴定证实融合基因hspA-ureB克隆入表达载体,并以融合蛋白形式MBP-HspA-UreB高效表达,相对分子量为119 000,约占细胞总蛋白的31%.通过大肠杆菌抗原吸收法纯化免疫小鼠血清后,与纯化的融合蛋白进行杂交,结果显示在119 000处出现特异杂交带.结论:融合蛋白HspA-UreB具有良好的免疫原性和免疫反应性.
关键词：幽门螺杆菌HspA-UreB表达免疫学
分类号：R392.2(医学免疫学)
资助基金：创新工程项目(20001004)河南省科技攻关计划(0424410035)
论文发表日期：2005-01-01
在线出版日期：2026-09-12（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 193-196,207 )
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