Dok4和Dok5 PTB结构域融合蛋白的表达和纯化
阎志勇1
吴爱群1
张勇2
由振东2
路长林2
周明明3
何成2
1.郑州大学医学院解剖学教研室,河南郑州,4500522.第二军医大学神经生物学教研室,上海,2004333.纽约大学Mount Sinai医学院生理与生物物理学系,纽约,10029
摘要：目的: 制备Dok4和Dok5 PTB结构域的GST融合蛋白.方法: 用PCR方法分别扩增编码Dok4、Dok5 PTB结构域的cDNA, 并将其克隆入表达载体pGEX-4T-3 中,转化大肠杆菌BL-21,构建成表达GST-PTB融合蛋白的菌株.经IPTG诱导表达后,经Glutathion-Sepharose 4B亲和层析柱纯化,用SDS-PAGE进行分析,该融合蛋白的表达量超过菌体总蛋白的25%.结果: 获得重组的 GST-4PTB和GST-5PTB融合蛋白,纯度在95%以上,产物得率约75%. 结论: 成功制备高纯度Dok4和Dok5 PTB结构域的GST融合蛋白,为进一步研究磷酸化酪氨酸结合结构域(PTB)的结构和生物学功能奠定基础.
关键词：Dok4Dok5PTB结构域重组蛋白
分类号：Q812(生物工程学(生物技术))
资助基金：国家自然科学基金(30070167)海外青年学者合作研究基金(30028003)国家重点基础研究发展计划（973计划）(G1999054000)
论文发表日期：2003-01-01
在线出版日期：2026-09-12（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 100-103 )
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