MTT显色反应实验条件分析
赵承彦1
靖志安1
牛青霞2
1.河南省肿瘤研究所生物医学研究室 河南郑州 4500032.汕头大学医学院微生物系 广东汕头 515031
摘要：目的：检验分析MTT实验方法本底高、灵敏度低、稳定性差的影响因素，改进实验条件提高灵敏度和稳定性，降低本底。方法：用MTT比色方法，细胞毒试验及细胞增殖实验，分析比较不同条件下MTT显色反应的性能特点。结果：比较了13种溶剂对Formazan的溶解性能。分析检验了琥珀酸脱氢酶在细胞上的分布特点、pH值对MTT反应体系的影响、酚红和牛血清对检验结果的影响，提出相应对策。检测了MTT反应时间曲线和细胞活力曲线。分析了改进后的MTT实验方法的灵敏度和稳定性。结论：以MTT为底物的酶在细胞代谢中主要分布在细胞膜表面。MTT反应体系的pH值为6.7，比较好的Formazan溶剂是正丙醇、异丙醇和乙二醇乙醚。去掉细胞培养上清，检测细胞上的酶，用溶剂使蛋白质变性，经沉淀去掉蛋白质影响，能使MTT实验方法的本底降低，灵敏度提高。通常情况下该方法检测K-562细胞和人淋巴细胞的灵敏度分别为1000和10000个细胞左右。
关键词：MTT酶释放法比色方法
分类号：R392.12(医学免疫学)
论文发表日期：2000-01-01
在线出版日期：2026-09-12（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 107-111,116 )
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