猪重要冠状病毒三重RT-RAA快速检测技术的建立
郑昊天1
张彪1
从家豪1
凌向辉1
袁文举1
黄慧慧1
刘冠尚1
陈兆江1
师寒雪1
吴宇轩1
郭怡彤1
袁晋2
万博3
郑关民4
张改平3
张雨杭3
1.河南农业大学 动物医学院/动物免疫学国家国际联合研究中心,河南 郑州 4500462.河南农业大学 动物医学院/动物免疫学国家国际联合研究中心,河南 郑州 450046;河南农业大学 动物病原与生物安全教育部重点实验室,河南 郑州 4500463.河南农业大学 动物医学院/动物免疫学国家国际联合研究中心,河南 郑州 450046;河南农业大学 动物病原与生物安全教育部重点实验室,河南 郑州 450046;河南省龙湖现代免疫实验室,河南 郑州 4500464.河南中医药大学 医学院,河南 郑州 450046
摘要：为应对猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)和猪δ冠状病毒(Porcine deltacoronavirus,PDCoV)等临床症状相似的仔猪病毒性腹泻主要病原的鉴别难题,以这3种病毒高度保守的RdRp基因为靶标,分别设计并筛选出适用于重组酶介导等温扩增(Recombinase aided amplification,RAA)的特异性引物,建立了一种可同步检测PEDV、TGEV和PDCoV的三重RAA检测方法.结果表明,该体系在37℃恒温条件下反应10 min,经琼脂糖凝胶电泳即可检测到大小分别为137、289、170 bp的特异性扩增条带;对PEDV、TGEV和 PDCoV 的检测灵敏度分别为 8.9、1.1、7.5 copies/μL,且与猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)、猪星状病毒(Porcine astrovirus,PAstV)及猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)无交叉反应.应用该方法对93份临床样本进行平行比对测试,总体检出率为5.38%,与已报道的PEDV、TGEV、PDCoV单重定量PCR检测结果相比,符合率达100%,显示出良好的临床应用可靠性.综上,该方法为猪肠道冠状病毒的现场快速鉴别提供了一种精准、高效的新型检测工具.
关键词：猪流行性腹泻病毒猪传染性胃肠炎病毒猪δ冠状病毒重组酶介导等温扩增多重检测
分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)
资助基金：河南省科技研发计划联合基金项目(242103810004)国家重点研发计划(2023YFD1801302)国家重点研发计划(2023YFD1801303)
论文发表日期：2026-08-15
在线出版日期：2026-09-12（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：11( 125-135 )
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