地黄灼烧病毒RT-LAMP快速检测方法的建立与应用
鲁书豪1
文艺1
高素霞1
李雪梦1
杨瑾1
李绍建1
李想1
徐国豪1
齐红志2
王飞1
秦艳红1
1.河南省农业科学院 植物保护研究所,河南 郑州 4500022.河南省农业科学院 农业信息技术研究所,河南 郑州 450002
摘要：地黄灼烧病毒(Rehmannia torradovirus virus,ReTV)是首次在地黄上报道的新病毒,严重危害地黄田间生长.为建立快速检测ReTV的反转录环介导等温扩增技术(RT-LAMP),以ReTV外壳蛋白(Coat protein,CP)基因为靶标基因设计了4组特异性引物,利用电泳检测及可视化方法(加SYBR GreenⅠ显色剂)进行引物筛选和RT-LAMP产物鉴定,同时以单一变量法优化RT-LAMP反应条件,以ReTV重组质粒为模板检测特异性和灵敏度,并对田间地黄样品进行检测应用.结果表明,建立的ReTV RT-LAMP检测方法最适反应条件为65℃60 min;特异性检测结果表明,只有ReTV为模板显示阳性,与地黄上其他病毒无交叉反应;RT-LAMP灵敏度是常规RT-PCR的100倍,可检测到3.39×100拷贝/µL;在样品检测中RT-LAMP方法的阳性检出率(100%)高于常规RT-PCR方法(93.75%),表明RT-LAMP方法准确性高于常规RT-PCR方法.建立的RT-LAMP检测技术为ReTV的准确检测提供了快速、特异、简便的方法.
关键词：地黄灼烧病毒地黄环介导等温扩增技术可视化检测
分类号：S435.672(病虫害及其防治)
资助基金：现代农业产业技术体系(CARS-21)河南省中药材产业技术体系项目(HARS-22-11-Z1)河南省科技攻关项目(252102111114)
论文发表日期：2026-02-15
在线出版日期：2026-09-12（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：9( 80-88 )
英文信息