基于LAMP技术的番茄灰霉病早期快速检测
赵芊1
李文2
李西柳2
贾振华1
封晓娟3
宋水山1
1.河北省科学院 生物研究所,河北 石家庄 050051;河北省主要农作物病害微生物控制技术创新中心,河北 石家庄 0500512.河北省科学院 生物研究所,河北 石家庄 0500513.石家庄医学高等专科学校,河北 石家庄 050081
摘要：由灰葡萄孢菌引起的番茄灰霉病是番茄主要病害之一,对番茄的产量和品质造成严重影响.为了对番茄灰霉病进行早期快速检测,以灰葡萄孢菌的ACTIN基因为靶基因,基于环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP),设计并筛选出一组LAMP特异性引物,优化其反应体系和反应条件,实现对灰葡萄孢菌的快速等温扩增.通过琼脂糖凝胶电泳和SYBR Green Ⅰ可视化分析,确定Bst Ⅱ DNA聚合酶、dNTPs的最佳用量和内外引物最佳比例分别为0.6 U/μL、1.25 mmol/L、2∶1,在61℃反应40 min即可特异性检测出灰葡萄孢菌,其灵敏度可达100 ag/μL,是普通PCR检测灵敏度的106倍.将该方法应用于番茄病害检测时,其对灰葡萄孢菌的孢子检出限达到20个/mL,且可在番茄被侵染4d、尚无明显灰霉病感病表型的番茄叶片中检测出来,可用于番茄灰霉病的早期快速、灵敏、可视化检测.
关键词：番茄灰葡萄孢菌灰霉病环介导等温扩增ACTIN基因
分类号：S436.412(病虫害及其防治)
资助基金：河北省中央引导地方科技发展资金项目(226Z6501G)河北省科学院科技计划项目(23306)河北省科学院科技计划项目(24306)河北省科学院科技计划项目(25306)
论文发表日期：2025-06-15
在线出版日期：2026-09-12（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 84-91 )
英文信息