磷脂酰肌醇-3激酶抑制剂对水疱性口炎病毒体外增殖的影响
王梦迪1
樊文杰2
张震3
赵瑞红1
李华玮4
刘昆5
郑鸣1
王亚锴1
1.河南牧业经济学院 食品与生物工程学院,河南 郑州 4500462.河南农业大学 动物医学院,河南 郑州 4500463.河南牧业经济学院 动物医药学院,河南 郑州 4500464.河南牧业经济学院 畜产品质量安全技术研究院,河南 郑州 4500465.河南省非常规饲料资源创新利用重点实验室,河南 郑州 450046
摘要:研究磷脂酰肌醇-3激酶抑制剂(PI3K-IN-1)在PK-15细胞模型上对水疱性口炎病毒(Vesicular stomatitis virus,VSV)体外增殖的影响,揭示PI3K-IN-1在体外细胞中对VSV的抗病毒作用,为寻求和开发防控VSV感染的药物奠定基础.采用CCK-8法检测PI3K-IN-1在细胞水平上的安全使用浓度;采用流式细胞术检测PI3K-IN-1对细胞周期中各时期占比和凋亡率的影响;利用流式细胞术和荧光显微镜分析PI3K-IN-1处理PK-15细胞感染VSV后病毒增殖的差异;利用RT-qPCR分析VSV N基因的mRNA表达量;利用免疫印迹技术分析VSV-GFP中GFP蛋白的表达量;利用病毒滴度测定试验检测PI3K-IN-1对VSV子代病毒滴度的影响;利用共聚焦显微镜分析PI3K-IN-1对VSV-GFP中GFP蛋白荧光强度的抑制作用.结果表明,0~10 μmol/L PI3K-IN-1对PK-15细胞活力、细胞周期中各时期占比和细胞凋亡率无影响,但随着PI3K-IN-1浓度的增加,VSV-GFP中GFP蛋白的表达量降低,当PI3K-IN-1的浓度为10 μmol/L时,对VSV增殖的抑制效果最好;PI3K-IN-1处理组VSV N基因mRNA相对表达量显著或极显著低于DMSO(CK)组且呈时间依赖趋势;VSV-GFP感染12h和24h时,PI3K-IN-1处理组与CK相比,GFP阳性荧光细胞比例极显著降低;PI3K-IN-1处理组子代病毒滴度与CK相比在感染12、24 h时显著降低,在感染36h时极显著降低.综上,PI3K-IN-1可有效抑制VSV在PK-15细胞中的增殖,为研究和开发抗VSV药物提供了新的策略与方法.
关键词:水疱性口炎病毒磷脂酰肌醇-3激酶抑制剂抗病毒体外增殖
分类号:S852.65(动物医学(兽医学))
资助基金:国家自然科学基金(32402849)河南省重点研发专项(241111110300)河南省科技攻关项目(252102110035)河南省科技攻关项目(222102110158)河南省教育科学规划一般课题(2024YB0273)河南牧业经济学院教育教学改革研究与实践项目(2024XJJYXM46)
论文发表日期:2025-04-15
在线出版日期:2026-09-12(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:8( 136-143 )
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