乙基香兰素人工抗原的合成及鼠源多克隆抗体的制备
赵银丽
陈盼盼
王金荣
段二珍
甘丽平
河南工业大学 生物工程学院,河南 郑州 450001
摘要：为研究检测乙基香兰素(EV)的免疫学方法,采用活性酯(AE)和混合酸酐(MA)2种方法,将乙基香草酸(EVA)与牛血清白蛋白(BSA)偶联,制备乙基香兰素人工免疫抗原BSA-EV(AE)和BSA-EV(MA),并采用紫外扫描(UV)和凝胶电泳(SDS-PAGE)对人工抗原进行鉴定.将BSA-EV(AE)和BSA-EV(MA)分别免疫BALB/c小鼠,3免后10d断尾采血并分离血清制备鼠源多克隆抗体.采用间接ELISA法测定血清抗体效价,间接竞争ELISA法测定血清抗体敏感性和特异性.结果显示,乙基香兰素人工抗原制备成功,BSA-EV(AE)和BSA-EV(MA)的偶联比分别为1∶2.92和1∶37.95.BSA-EV(AE)免疫组3号血清效价最高为1∶51 200,对EV的半数抑制浓度(IC50)为173.78 μg/L,线性范围为14.79～2 041.74 μg/L.BSA-EV(MA)免疫组 1 号血清效价最高为1∶102 400,对EV的IC50 为617.00 μg/L,线性范围为42.66～8 709.64 μg/L.2个免疫组的血清抗体与香兰素、甲基香兰素、麦芽酚、乙基麦芽酚、BSA、鸡卵清蛋白(OVA)的交叉反应率均小于1%.综上,人工抗原BSA-EV合成成功,并成功制备了对EV灵敏特异的鼠源多克隆抗体.
关键词：乙基香兰素人工抗原活性酯法混合酸酐法多克隆抗体间接竞争ELISA
分类号：S852.5(动物医学（兽医学）)TS202(食品工业)
资助基金：国家自然科学基金(32202696)
论文发表日期：2024-06-15
在线出版日期：2026-09-12（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 173-180 )
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