新型鹅星状病毒衣壳蛋白原核表达及多克隆抗体制备
高冬生1
张菡2
王海燕3
张晓战3
赵盼盼3
于彤彤3
宋幸辉3
乔宏兴3
李庆东4
彭志锋3
1.河南牧业经济学院 动物医药学院,河南 郑州 450046;河南省大河农畜牧科技有限公司,河南 郑州 4500002.河南炎黄生物工程有限公司,河南 郑州 4500003.河南牧业经济学院 动物医药学院,河南 郑州 4500464.商丘市动物检疫和疫病预防控制中心,河南 商丘 476000
摘要：为了研制针对新型鹅星状病毒(GAstV)的血清学检测方法和高效抗体,克隆新型GAstV HNZZ-4毒株的ORF2基因序列,构建pET-32a-Cap重组质粒,进行衣壳蛋白(Cap)原核表达;用重组Cap蛋白免疫兔只制备多克隆抗体,并采用Western blot和免疫过氧化物酶单层试验鉴定制备的多克隆抗体的反应原性.结果表明,重组质粒pET-32a-Cap经限制性内切酶NdeⅠ和XhoⅠ进行酶切后,得到大小约5 000 bp和750 bp的2个与预期一致的条带;阳性重组质粒测序结果显示,成功构建了重组表达载体pET-32a-Cap;pET-32a-Cap原核表达获得了分子质量约为27.5 ku的GAstV重组Cap蛋白;制备的兔抗GAstV Cap多克隆抗体能够与重组Cap蛋白发生特异性反应,且能特异性结合感染LMH细胞的GAstV.综上,制备的兔源抗新型GAstV Cap多克隆抗体保留了抗原性,特异性较好.
关键词：鹅星状病毒衣壳蛋白原核表达多克隆抗体
分类号：S856(动物医学（兽医学）)
资助基金：河南省科技攻关计划项目(232102110109)河南牧业经济学院科研创新基金项目(XKYCXJJ2020011)河南牧业经济学院预防兽医重点学科项目(XJK202202)
论文发表日期：2024-04-15
在线出版日期：2026-09-12（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 137-142 )
英文信息