猪IFN-α8的原核表达及抗猪繁殖与呼吸综合征病毒活性研究
方剑玉1
张青娴1
郎利敏1
徐彬2
王改利2
席燕燕2
冯现明3
王克领1
李绍钰2
1.河南省农业科学院畜牧兽医研究所,河南郑州4500022.河南省农业科学院畜牧兽医研究所,河南郑州450002;河南省农业科学院畜禽繁育与营养调控河南省重点实验室,河南郑州4500023.林州市动物疫病预防控制中心,河南林州456550
摘要：为确定猪干扰素α8(poIFN-α8)蛋白对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的抗病毒作用,合成poIFN-α8基因,克隆入pCSMH大肠杆菌表达载体,将重组表达载体转化DH5α感受态细胞,进行温度诱导表达后,收集菌体进行SDS-PAGE电泳.将表达的目的蛋白利用Ni-琼脂糖凝胶纯化柱纯化后,采用Western blot试验检测重组poIFN-α8的反应原性,利用猪肺泡巨噬细胞(PAM)检测0.01、0.05、0.1、1 ng/mL的重组poIFN-α8蛋白对PRRSV的抗病毒活性,并检测重组poIFN-α8蛋白对下游干扰素刺激基因(ISG)Mx1、OAS1、ISG15的诱导激活作用.结果表明,成功构建了 pCSMH-IFN-α8表达载体,实现了 poIFN-α8在大肠杆菌中的包涵体表达,且重组poIFN-α8蛋白具有良好的反应原性;0.05 ng/mL的重组poIFN-α8蛋白可显著抑制PRRSV在PAM中的复制,poIFN-α8的抗病毒效果显著优于猪干扰素α2(poIFN-α2)、猪干扰素α5(poIFN-α5),且重组poIFN-α8能有效激活ISG的表达.综上,表达的重组poIFN-α8蛋白能有效抑制PRRSV的复制,且能激活ISG的表达.
关键词：猪干扰素α8大肠杆菌表达猪繁殖与呼吸综合征病毒干扰素刺激基因抗病毒活性
分类号：S855.1(动物医学（兽医学）)
资助基金：河南省科技攻关项目(222102110054)河南省农业科学院自主创新项目(2022ZC44)
论文发表日期：2023-09-15
在线出版日期：2026-09-12（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 141-147 )
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