胭脂萝卜RsCHS1基因克隆及表达分析
王川艺1
黄红涛2
陈发波1
郑张飞1
方平2
1.重庆三峡学院生物与食品工程学院,重庆404100;长江师范学院现代农业与生物工程学院,重庆4081002.长江师范学院现代农业与生物工程学院,重庆408100
摘要:为解析RsCHS1基因在胭脂萝卜色素积累中的作用,以胭脂萝卜肉质根肉质cDNA为模板,同源克隆了 RsCHS1基因的开放阅读框(ORF),采用生物信息学方法对RsCHS 1蛋白的理化性质进行分析.利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析了 RsCHS1基因在胭脂萝卜营养期叶、肉质根肉质和肉质根皮及花期花、荚果和肉质根肉质中的表达情况,同时构建RsCHS1基因过表达载体,异源转化拟南芥,进行RsCHS1基因功能验证.结果表明,克隆得到2个RsCHS1基因,其中RsCHS1-a基因ORF序列长765 bp,编码254个氨基酸;RsCHS1-b基因ORF序列长966 bp,编码321个氨基酸.编码蛋白二、三级结构预测显示,α-螺旋是RsCHS1主要结构元件,β-转角、片层结构、无规则卷曲分布于整个蛋白质中.qRT-PCR结果表明,RsCHS1-a基因在肉质根肉质(26.8)、根皮(32.4)和花(6.7)中的相对表达量比叶(1.0)和果实(0.4)中高,RsCHS1-b基因在肉质根肉质(41.4)、根皮(41.9)和花(9.7)中的相对表达量比叶(1.0)和果实(0.6)中高,说明RsCHS1基因具有组织表达特异性.在拟南芥中过表达RsCHS1基因,发现转基因植株叶柄和茎累积大量花青素,表明RsCHS1基因在胭脂萝卜花青素积累中起到重要作用.
关键词:胭脂萝卜查尔酮合成酶基因(CHS)克隆表达模式花青素
分类号:S631.1(蔬菜园艺)
资助基金:重庆市教委科学技术研究重点项目(KJZD-K202101404)重庆市科学技术局鲁渝科技协作项目(cstc2021jscx-lyjsAX0004)重庆市自然科学基金面上项目(cstc2021jcyj-msxmX0083)
论文发表日期:2023-09-15
在线出版日期:2026-09-12(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:11( 122-132 )
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