奶牛乳房炎源肺炎克雷伯菌PCR和LAMP检测方法的建立
罗阳1
田唯嘉2
何芳1
浣成1
刘伯承1
张佰忠1
宋武1
杨青3
易康乐1
1.湖南省畜牧兽医研究所,湖南 长沙 4101312.湖南省畜牧兽医研究所,湖南 长沙 410131;湖南农业大学 动物医学院,湖南 长沙 4101253.湖南农业大学 动物医学院,湖南 长沙 410125
摘要：为快速鉴定因肺炎克雷伯菌侵染引起的奶牛乳房炎,进一步为该疾病提供更合理的治疗方案,分别以肺炎克雷伯菌16S-23S rDNA内部转录间隔层序列(Internal transcribed spacer,ITS)和脲酶UreD基因为靶点,利用PCR技术和环介导等温扩增技术(Loop?mediated isothermal amplification,LAMP)构建奶牛乳房炎源肺炎克雷伯菌快速鉴定方法.结果表明,利用PCR技术扩增ITS序列能准确鉴定出肺炎克雷伯菌,在核酸质量浓度为5×10-2 ng/μL的环境中依然能实现稳定扩增;利用LAMP技术扩增UreD基因的最佳反应温度为62℃,其最低检测核酸质量浓度为5×10-7 ng/μL,检测灵敏度是PCR方法的105倍.综上,建立了PCR技术和LAMP技术快速鉴定奶牛乳房炎型肺炎克雷伯菌的方法,特异性强且灵敏度高.
关键词：奶牛乳房炎肺炎克雷伯菌UreD基因PCRLAMP
分类号：S852.61(动物医学（兽医学）)
资助基金：湖南省重点研发计划项目(2022NK2025)湖南省重点研发计划项目(2020NK2066)长沙市科技计划项目(kh2201218)湖南创新型省份建设专项(2022NK4153)
论文发表日期：2023-02-15
在线出版日期：2026-09-12（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 145-150 )
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