miR-M11基因编辑对马立克病病毒体外复制的影响
王伟东1
滕蔓2
郑鹿平2
刘金玲2
张文凯3
李林燕3
张志会1
樊剑鸣4
罗俊3
1.河南省农业科学院动物免疫学重点实验室/农业农村部动物免疫学重点实验室/河南省动物免疫学重点实验室,河南郑州450002;郑州大学公共卫生学院,河南郑州450001;河南省农业科学院中英禽病国际研究中心,河南郑州4500022.河南省农业科学院动物免疫学重点实验室/农业农村部动物免疫学重点实验室/河南省动物免疫学重点实验室,河南郑州450002;河南省农业科学院中英禽病国际研究中心,河南郑州4500023.河南省农业科学院动物免疫学重点实验室/农业农村部动物免疫学重点实验室/河南省动物免疫学重点实验室,河南郑州450002;河南省农业科学院中英禽病国际研究中心,河南郑州450002;河南科技大学动物科技学院,河南洛阳4710034.郑州大学公共卫生学院,河南郑州450001
摘要：为探究病毒编码的微小RNA前体基因miR-M11对马立克病病毒(MDV)体外复制能力的影响,以MDV国内分离株HN302为研究对象,利用CRISPR/Cas9系统靶向编辑并敲除位于Mid基因簇的miR-M11,构建1株miR-M11基因编辑缺失毒株HN302ΔM11(克隆号C58-8-4).经过PCR鉴定、测序分析、间接免疫荧光试验(IFA)、实时荧光定量PCR(qPCR)以及传代稳定性分析,证实HN302编码的miR-M11 被精确编辑并从病毒基因组 中完全缺失,且未发生回复突变.病毒增殖曲线绘制结果显示,miR-M11 缺失毒株 HN302AM11的增殖速度显著高于亲本毒株HN302(P＜0.05).综上,miR-M11是MDV复制的非必需基因,且其缺失后可增强MDV的体外复制能力.
关键词：马立克病miR-M11微小RNACRISPR/Cas9基因编辑qPCR复制
分类号：S855.3(动物医学（兽医学）)
资助基金：国家自然科学基金(U21A20260)河南省自然科学基金(212300410359)河南省农业科学院自主创新项目(2022ZC65)
论文发表日期：2023-01-15
在线出版日期：2026-09-12（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：10( 134-143 )
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