鸡异质核糖核蛋白AB单克隆抗体的制备及鉴定
罗俊1
党露2
郑鹿平1
刘金玲1
柴书军1
赵东1
杨艳艳1
滕蔓1
1.河南省农业科学院动物免疫学重点实验室/农业农村部动物免疫学重点实验室/河南省动物免疫学重点实验室,河南郑州450002;河南省农业科学院中英禽病国际研究中心,河南郑州4500022.广州医科大学附属第三医院,广东广州510095
摘要：为研制鸡异质核糖核蛋白AB(hnRNPAB)单克隆抗体,为其生物学功能研究提供关键试剂,构建重组质粒pET-30a-hnRNPAB,转化感受态细胞E.coli BL21,经IPTG诱导表达,并通过树脂Ni对可溶性表达的鸡hnRNPAB蛋白进行亲和层析纯化之后免疫Balb/c小鼠,利用细胞融合技术制备抗鸡hnRNPAB的单克隆抗体细胞株,最终通过间接酶联免疫吸附试验(iELISA)筛选获得1株单克隆抗体杂交瘤细胞株5H2-H1.间接免疫荧光试验(IFA)和蛋白质免疫印迹(Western blot)分析表明,5H5-H1单克隆抗体可特异性识别鸡胚成纤维细胞(CEF)表达的hnRNPAB蛋白.同时IFA和间接免疫细胞化学试验(ICA)结果还显示,除了特异性识别鸡hnRNPAB蛋白之外,5H5-H1单克隆抗体还可以与源自人、鼠、猴、牛和猪在内的5种常见哺乳动物细胞系表达的hnRNPAB发生特异性反应.
关键词：鸡异质核糖核蛋白单克隆抗体间接免疫荧光试验Western blot分析间接免疫细胞化学试验
分类号：S855.3(动物医学（兽医学）)
资助基金：国家自然科学基金(U21A20260)河南省重点研发与推广专项(212102110097)河南省自然科学基金面上项目(212300410359)河南省农业科学院自主创新项目(2022ZC65)
论文发表日期：2022-02-15
在线出版日期：2026-09-12（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 127-132 )
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