携带NDV HN基因的减毒鼠伤寒沙门菌Ⅲ型分泌系统构建及其生物学特性分析
宋敏杰1
周小双2
石胜丽3
朱文文1
田文静1
程相朝1
郁川4
1.洛阳职业技术学院宠物与人类健康工程技术中心,河南洛阳4719002.河南科技大学动物科技学院/洛阳市活载体生物材料与动物疫病防控重点实验室,河南洛阳471023;新乡市动物卫生监督所,河南新乡4530003.河南科技大学动物科技学院/洛阳市活载体生物材料与动物疫病防控重点实验室,河南洛阳4710234.洛阳职业技术学院宠物与人类健康工程技术中心,河南洛阳471900;河南科技大学动物科技学院/洛阳市活载体生物材料与动物疫病防控重点实验室,河南洛阳471023
摘要:为构建能稳定携带新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)血凝素-神经氨酸酶蛋白(Hemagglutinin-neuraminidase protein,HN)基因的减毒鼠伤寒沙门菌Ⅲ型分泌系统,从pMD18-T-HN中扩增出NDV HN基因,并将其克隆入载体pYA3493-sopENt100,构建重组载体pYA3493-sopENt100-HN,然后将其电转化至减毒鼠伤寒沙门菌△crp△asdSL1344,并对其重组菌的生长特性、遗传稳定性、表达特性和毒力特性等进行分析.结果显示,携带NDV HN基因的重组减毒鼠伤寒沙门菌△crp△asd SL1344(pYA3493-sopENt100-HN)构建成功;重组菌△crp△asd SL1344(pYA3493-sopENt100-HN)的生长趋势与互补菌△crp△asd SL1344(pYA3493-sopENt100)和缺失菌4crp4asd SL1344相似,与亲本菌株SL1344有明显差异;重组菌能够稳定表达HN基因;减毒鼠伤寒沙门菌Ⅲ型分泌系统能够有效递呈HN基因,并诱导其在鸡胚成纤维细胞(Chicken embryo fibroblast,CEF)内表达;重组菌的LD50与互补菌和缺失菌没有明显差异,与亲本菌株SL1344差异较大.以上结果表明,成功构建了携带NDVHN基因的新型减毒鼠伤寒沙门菌Ⅲ型分泌系统△crp△asd SL1344(pYA3493-sopENt100-HN),能够有效递呈NDV HN基因并使其高效表达,且安全性高,遗传稳定.
关键词:新城疫病毒HN基因Ⅲ型分泌系统减毒沙门菌生物学特性
分类号:S858.31(动物医学(兽医学))
资助基金:河南省科技攻关计划(152102110078)
论文发表日期:2021-10-15
在线出版日期:2026-09-12(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:8( 116-123 )
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