非洲猪瘟病毒K145R蛋白的原核表达及其单克隆抗体制备
耿笑林1
孙杰2
王彦伟1
黄甜2
刘鹏1
曹红梅2
逄文强1
郝丽影2
邓均华2
黄玉欣1
田克恭3
1.国家兽用药品工程技术研究中心,河南 洛阳 471000;普莱柯生物工程股份有限公司,河南 洛阳 4710002.洛阳普泰生物技术有限公司,河南 洛阳 4710003.国家兽用药品工程技术研究中心,河南 洛阳 471000;普莱柯生物工程股份有限公司,河南 洛阳 471000;洛阳普泰生物技术有限公司,河南 洛阳 471000
摘要：为研发非洲猪瘟病毒(ASFV)的免疫诊断学试剂,利用大肠杆菌系统表达ASFV重组K145R蛋白,制备并鉴定K145R蛋白单克隆抗体.结果显示,成功构建pET28a-K145R表达载体,表达得到大小约为17 ku可溶性的重组K145R蛋白.Western blot分析证实,重组K145R蛋白与ASFV阳性血清有良好的反应性.经细胞融合、筛选,得到单克隆抗体1D4;ELISA检测其效价为1:5120000;亚类鉴定其重链为IgG2a,轻链为κ;Western blot鉴定其能特异性识别重组K145R蛋白;IFA检测其能与ASFV反应.综上,实现K145R蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达并制备单克隆抗体.
关键词：非洲猪瘟病毒K145R蛋白原核表达Western blot鉴定单克隆抗体
分类号：S855.3(动物医学（兽医学）)
资助基金：洛阳市科技重大专项(1901029A)
论文发表日期：2021-08-15
在线出版日期：2026-09-12（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 154-159 )
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