猪繁殖与呼吸综合征病毒类NADC30毒株与JXA1-R疫苗株荧光定量PCR鉴别检测方法的建立及应用
周新宇1
陈鑫鑫2
乔松林2
郭振华2
李睿2
邓瑞广2
张改平1
1.河南农业大学动物医学院,河南郑州 450002;河南省农业科学院动物免疫学重点实验室,河南郑州 4500022.河南省农业科学院动物免疫学重点实验室,河南郑州 450002
摘要：为鉴别检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)类NADC30毒株HNhx和JXA1-R疫苗株,根据类NADC30毒株HNhx和JXA1-R疫苗株非结构蛋白2(Nsp2)基因序列差异,设计特异性引物和探针,建立TaqMan荧光定量PCR和SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法.结果显示,2种方法中,标准品在103～108拷贝/μL均具有良好线性关系,标准曲线R2值均在0.990以上;基于TaqMan探针法的荧光定量PCR方法,JXA1-R株、HNhx株的最低检出量分别为104、103拷贝/μL,SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法的最低检出量均为100拷贝/μL;重复性分析结果显示,批内和批间试验的变异系数均小于1.5％,呈现出良好重复性.综上,成功建立了鉴别检测类NADC30毒株HNhx和JXA1-R疫苗株的方法,且稳定性好、特异性强,可以为PRRSV的鉴别检测提供技术支持.
关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒JXA1-R疫苗株HNhx毒株TaqMan荧光定量PCRSYBR Green Ⅰ荧光定量PCR鉴别检测
分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)
资助基金：青年科技基金(2020JQ06)河南省生猪产业体系创新团队项目(S2012-06)现代农业(生猪)产业技术体系专项基金项目(CARS-35)
论文发表日期：2021-01-15
在线出版日期：2026-09-12（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：10( 142-151 )
英文信息