传染性法氏囊病毒VP2蛋白的原核表达及其免疫效果评价
李甜甜1
蒋大伟2
姬鹏超2
王银铃2
张改平3
1.河南农业大学 牧医工程学院,河南 郑州 450002;河南省农业科学院 动物免疫学重点实验室,河南 郑州 4500022.河南农业大学 牧医工程学院,河南 郑州 4500023.河南农业大学 牧医工程学院,河南 郑州 450002;河南省农业科学院 动物免疫学重点实验室,河南 郑州 450002;江苏高校动物重要疾病与人兽共患病防控协同创新中心,江苏 扬州 225009
摘要：为提高原核表达传染性法氏囊病毒(IBDV)VP2蛋白纯度,在大肠杆菌中表达VP2蛋白,并对其进行纯化方法优化及其免疫原性分析.利用琼脂扩散试验(AGP)测定VP2蛋白效价并进行SDS-PAGE和Western blot鉴定;采用饱和硫酸铵溶液和离子交换层析对目的蛋白进行纯化,并对纯化填料、洗脱液离子强度及缓冲液的pH值进行优化,以确定最佳纯化条件.将纯化的VP2蛋白免疫SPF鸡,定期采血用ELISA方法测定其免疫抗体并进行病理组织检测.SDS-PAGE及West-ern blot鉴定结果显示,VP2分子质量约为50 ku,且具有良好反应原性,VP2蛋白可溶性表达的AGP效价为1:16.纯化结果显示,利用强阴离子层析优化盐离子浓度及pH值可获得纯度较高的VP2蛋白,其质量浓度为0.6 mg/mL.纯化的VP2蛋白加商业佐剂免疫鸡28 d后,鸡产生的特异性免疫抗体滴度最高,且攻毒后的保护率可达到80％,法氏囊无明显病理组织损伤.综上,利用大肠杆菌成功表达了VP2蛋白,纯化的VP2蛋白纯度较高且具有良好的免疫原性.
关键词：传染性法氏囊病病毒VP2蛋白大肠杆菌蛋白质纯化免疫原性
分类号：S855.3(动物医学（兽医学）)
资助基金：国家重点研发计划(2017YFD0501100)国家自然科学基金(31802165)
论文发表日期：2020-09-15
在线出版日期：2026-09-12（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 136-142 )
英文信息