近暗散白蚁 β-葡萄糖苷酶RpBgl7的异源表达及酶学性质研究
毛国涛
刘茜
王方园
苏丽娟
张宏森
宋安东
1.河南农业大学 生命科学学院,河南 郑州 4500022.河南农业大学 生命科学学院,河南 郑州 4500023.河南农业大学 生命科学学院,河南 郑州 4500024.河南农业大学 生命科学学院,河南 郑州 4500025.河南农业大学 生命科学学院,河南 郑州 4500026.河南农业大学 生命科学学院,河南 郑州 450002
摘要：为研究近暗散白蚁(Reticulitermes perilucifugus)β-葡萄糖苷酶RpBgl7,利用生物信息学分析β-葡萄糖苷酶RpBgl7的家族及结构特点,构建RpBgl7的重组表达载体pCold-TF-RpBgl7,在大肠杆菌中过量表达并纯化,分析其最适反应条件和酶动力学参数.结果表明,RpBgl7属于糖苷水解酶1家族,具有2个保守的谷氨酸催化残基Glu187和Glu394.RpBgl7在BL21(DE3)中过量表达,经过镍离子亲和层析1步纯化可得到高纯度RpBgl7重组蛋白.以4-硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷为底物,测得RpBgl7的最适pH值为6.0,最适温度为70℃;动力学参数K m=0.13 mmol/L,kcat=3.15 s-1.RpBgl7可耐受Na+、K+、Mg2+、Cu2+和Ba2+,而Ca2+、Hg2+和Fe3+明显抑制RpBgl7的酶活力.
关键词：近暗散白蚁β-葡萄糖苷酶大肠杆菌宿主融合表达纯化酶学性质金属离子耐受性
分类号：S763.3(森林保护学)
资助基金：国家自然科学基金(31800050)
论文发表日期：2020-07-15
在线出版日期：2026-09-12（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 68-74 )
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