猪细小病毒病毒样颗粒的制备及其免疫评价
陈玉梅1
周景明1
刘东民2
马丽萍1
冯景2
刘运超2
1.郑州大学生命科学学院,河南郑州 4500012.河南中泽生物工程有限公司,河南郑州 450000
摘要：为了研制猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)病毒样颗粒(Virus-like particles,VLPs)疫苗,结合大肠杆菌密码子偏好性,经密码子优化,合成猪细小病毒VP2蛋白编码区序列,并将其插入原核表达载体pET28a中,随后转化BL21(DE3)感受态细胞,再转入伴侣蛋白质粒pTf16构建共表达载体,优化诱导表达条件,进行SDS-PAGE及Western blot鉴定.结果表明,在L-阿拉伯糖质量浓度为2 mg/mL、IPTG浓度为0.1 mmol/L、温度为30℃、诱导12 h时重组蛋白VP2可溶性表达量最高,经硫酸铵沉淀和Ni-NTA亲和层析纯化获得纯度约90％的VP2蛋白,体外装配可形成直径约20 nm的具有血凝活性的VLPs.用制备的VLPs免疫昆明鼠并对其进行免疫评价,结果表明,制备的VLPs能有效刺激机体产生高滴度抗体,ELISA效价高达1:25600.可见,制备的VLPs能刺激机体产生特异性抗体.
关键词：猪细小病毒VP2蛋白病毒样颗粒疫苗免疫评价
分类号：S855.3(动物医学（兽医学）)
资助基金：河南省科技攻关计划(172102110133)
论文发表日期：2020-04-15
在线出版日期：2026-09-12（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 131-137 )
英文信息