抗猪瘟病毒中和性单克隆抗体的制备与鉴定
刘运超1
陈玉梅2
冯丽丽3
汪磊1
王聚财1
陆东峰4
张改平1
1.河南省农业科学院 动物免疫学重点实验室/农业部动物免疫学重点开放实验室,河南 郑州,4500022.郑州大学 生命科学学院,河南 郑州,4500013.河南省农业科学院 农业经济与信息研究所,河南 郑州,4500024.河南花花牛实业总公司,河南 郑州,450006
摘要：为了获得具有中和活性的抗猪瘟病毒(CSFV)单克隆抗体,分别将CSFV和杆状病毒表达系统表达纯化的CSFV E2蛋白与佐剂混合后免疫BABL/c小鼠,经杂交瘤细胞融合制备抗CSFV单克隆抗体,经过多轮亚克隆和免疫过氧化物酶单层试验(IPMA)筛选,成功获得5D1、8H7、9A1和13B2共4株能够稳定分泌抗CSFV单克隆抗体的杂交瘤细胞株.4株单克隆抗体轻链均属于 κ型,其中5D1、8H7、13B2为IgG1亚型,9A1为IgG2c亚型.间接ELISA检测结果显示,4株单克隆抗体的腹水效价在2.56×105～1.02×106;IPMA效价分别为6.40×104、1.28×105、2.56×105、1.28×105;SDS-PAGE和Western blot检测结果显示,4株单克隆抗体均能与经原核表达系统及杆状病毒表达系统获得的CSFV E2蛋白发生特异性反应;IPMA检测结果显示,4株单克隆抗体均能与CSFV发生特异性反应,而与牛流行性腹泻病毒(BVDV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪圆环病毒(PCV2)均无交叉反应.病毒中和试验证实,单克隆抗体13B2具有中和活性,其中和效价为1.28×104.综上,成功筛选出4株能够分泌抗CSFV特异性抗体的杂交瘤细胞株,其中单克隆抗体13B2具有中和CSFV感染活性.
关键词：猪瘟病毒E2蛋白中和性单克隆抗体抗体中和效价免疫过氧化物酶单层细胞试验
分类号：S855.3(动物医学（兽医学）)
资助基金：国家重点研发计划(2016YFD0500704)国家重点研发计划(2017YFD0501103)
论文发表日期：2019-01-01
在线出版日期：2026-09-12（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 114-120 )
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