猪流感病毒NP蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
李鸽1
刘肖1
李青梅2
杨艳艳2
王彦红2
张改平3
1.河南农业大学 牧医工程学院,河南 郑州,4500022.河南省农业科学院 动物免疫学重点实验室,河南 郑州,4500023.河南农业大学 牧医工程学院,河南 郑州450002;河南省农业科学院 动物免疫学重点实验室,河南 郑州450002;江苏高校动物重要疾病与人兽共患病防控协同创新中心,江苏 扬州225009
摘要：为了制备猪流感病毒(SIV)核蛋白(NP)的单克隆抗体(MAb),采用差速离心法纯化H1N1和H3 N2亚型SIV后交叉免疫BALB/c小鼠,利用淋巴细胞杂交瘤技术制备杂交瘤细胞,通过建立的免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)单克隆抗体检测方法进行筛选.获得3株能稳定分泌抗NP蛋白的杂交瘤细胞,分别命名为16 D5、18 G8和20 C4,将它们诱导小鼠产生的腹水IPMA效价分别为1×10-6、1×10-6和1×10-5.亚型鉴定结果显示,3株单克隆抗体的重链均为IgG1,轻链为κ链.3株单克隆抗体特异识别H1 N1、H3 N2、H5 N1、H7 N9和H9 N2亚型流感病毒,并且与猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒和猪细小病毒无交叉反应.Western blot检测结果表明,3株杂交瘤细胞培养上清均在56 ku附近出现一条特异性的蛋白质条带,说明针对SIV的NP蛋白制备了3株单克隆抗体.综上,成功制备了针对SIV NP蛋白的3株单克隆抗体,可识别不同亚型的SIV.
关键词：猪流感病毒免疫过氧化物酶单层细胞试验NP蛋白单克隆抗体
分类号：S852.4(动物医学（兽医学）)
资助基金：国家重点研发计划(2016YFD0500701)
论文发表日期：2019-01-01
在线出版日期：2026-09-12（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 129-133 )
英文信息