木槿ISSR-PCR反应体系的建立及优化
任雪羽
王晓红
肖芬
周英
1.中南林业科技大学 风景园林学院,湖南 长沙,4100042.中南林业科技大学 风景园林学院,湖南 长沙,4100043.中南林业科技大学 风景园林学院,湖南 长沙,4100044.中南林业科技大学 风景园林学院,湖南 长沙,410004
摘要：建立木槿ISSR-PCR反应体系,为木槿种质资源的创新与鉴定提供理论基础.采用正交试验法,对影响PCR结果的Taq酶用量、Mg2+浓度、dNTPs浓度、模板DNA用量及引物浓度5个因素进行分析,采用单因素试验对退火温度进行筛选,并利用最佳体系对24个木槿品种进行扩增验证.结果表明,最优反应体系(25μL)中,含10×buffer(Mg2+free)2.5μL、Taq酶0.75 U、Mg2+2.0 mmol/L、dNTPs 0.10 mmol/L、模板DNA 100 ng、引物0.5μmol/L.PCR反应程序为94℃预变性2 min;94℃变性30 s,50℃退火30 s,72℃延伸1 min,34个循环;72℃延伸6 min,4℃保温.建立的体系对24个木槿品种能够扩增出清晰稳定、无拖带、多态性高的条带.
关键词：木槿ISSR-PCR反应体系
分类号：S684(观赏园艺（花卉和观赏树林）)
资助基金：国家林业局948项目(20150417)国家林业局风景园林学重点学科资助项目(林人发[2016]21号)湖南省教育厅"十二五"重点学科资助项目(2011-76)
论文发表日期：2019-01-01
在线出版日期：2026-09-12（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 106-110 )
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