斜纹夜蛾保幼激素环氧水解酶基因的克隆和原核表达
张丽丽1
武怡琼1
杨正飞1
郭丽1
魏佳平1
阚云超2
1.信阳师范学院 生命科学学院/大别山农业生物资源保护与利用研究院,河南 信阳,4640002.南阳师范学院/河南省伏牛山昆虫生物学实验室,河南 南阳,473061
摘要：为分析斜纹夜蛾(Spodoptera litura)保幼激素环氧水解酶(Juvenile hormone epoxide hydrolase,JHEH)基因在其生长发育过程中的功能,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增SlJHEH基因的开放阅读框,并进行原核表达.SlJHEH基因开放阅读框为1 389 bp,编码462个氨基酸,预测蛋白质分子质量为52 ku,等电点为8.68.氨基酸序列存在催化三联体Asp226、Glu402和His429氨基酸残基及阴氧离子洞Tyr297、Tyr372和HGWP花样结构氨基酸残基.系统发育树分析结果表明,Sl JHEH与棉铃虫(Helicoverpa armigera)JHEH亲缘关系最近,氨基酸序列同源性高达78％.将SlJHEH的编码区连接到原核表达载体p ET32a上,成功构建了重组载体pET32aSlJHEH,转入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中进行诱导表达.对表达产物进行SDS-PAGE和Western blotting检测,结果显示,斜纹夜蛾JHEH基因在大肠杆菌中得到高效且准确的表达.
关键词：斜纹夜蛾保幼激素环氧水解酶克隆序列分析原核表达重组蛋白
分类号：S433.4(病虫害及其防治)
资助基金：河南省科技攻关计划(182102110034)信阳师范学院大学生科研基金(2017-DXS-141)实验室开放基金(201807)
论文发表日期：2018-12-01
在线出版日期：2026-09-12（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 84-89 )
英文信息