当归MYB4转录因子基因的克隆及表达分析
杨雪1
雒军2
杨彩霞1
王振恒1
夏琦2
王引权1
1.甘肃中医药大学 药学院,甘肃 兰州,7300002.甘肃中医药大学 科研实验中心,甘肃 兰州,730000
摘要：为探索当归(Angelica sinensis)药效成分阿魏酸生物合成中MYB蛋白的结构和功能,从当归中克隆转录因子基因MYB4,并进行序列分析和表达分析.根据MYB4转录因子的DNA保守结构域,结合同源克隆及RACE的原理,运用RT-PCR技术从当归中克隆MYB4基因cDNA的全长序列;利用生物信息学分析工具对该基因编码蛋白质的基本性质、结构特点及生物学功能进行初步预测;应用qRT-PCR分析该基因的表达特征;使用重组技术组装原核表达载体p GEX-4T-3-As MYB4,热击法转化至大肠杆菌BL21(DE3),IPTG(异丙基硫代-β-D-半乳糖苷)诱导重组蛋白表达.结果表明,成功克隆1个MYB4基因,命名为As MYB4,在GenBank中注册,登录号为MG736315;序列分析表明,As MYB4的cDNA全长为1 189 bp,包括804 bp的开放阅读框,编码267个氨基酸,为典型的R2R3-MYB类转录因子家族成员;As MYB4与胡萝卜MYB308的同源性达到93％,且亲缘关系最近.组织特异性表达分析表明,As MYB4基因在当归叶片中的转录水平最高,分别是叶柄、根的1.1、2.0倍;异源表达分析表明,As MYB4蛋白以包涵体形式存在,分子质量为30 ku.
关键词：当归阿魏酸合成MYB转录因子基因克隆表达分析
分类号：S567(经济作物)
资助基金：国家重点研发计划(2017YFC1700705)国家自然科学基金(81660625)甘肃省高校协同创新科技团队支持计划项目(2016C-05FF09)
论文发表日期：2018-12-01
在线出版日期：2026-09-12（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：9( 48-56 )
英文信息