山葡萄类黄酮-3-O-葡萄糖基转移酶基因的表达分析
陈蒙
袁赫海
杨铭慧
张宇
刘海峰
1.延边大学农学院,吉林延吉,1330022.延边大学农学院,吉林延吉,1330023.延边大学农学院,吉林延吉,1330024.延边大学农学院,吉林延吉,1330025.延边大学农学院,吉林延吉,133002
摘要:为了探究VAm3GT蛋白表达和在山葡萄体内酶学特征及生物学功能,进一步证实克隆所获得目的基因的准确性.利用实时定量PCR法对山葡萄果皮8个不同转色时期类黄酮-3-O-葡萄糖基转移酶基因(VAm3GT)的表达量进行了分析,并通过双酶切、连接转化等方法将VAm3GT基因克隆到原核表达载体pET28a上,构建原核表达重组质粒pET28a-VAm3GT.重组质粒转化至E.coli BL21后经不同浓度的IPTG诱导,通过SDS-PAGE分析表明,在适宜的IPTG诱导浓度下,VAm3GT基因在大肠杆菌BL21中得到高效表达,表达的融合蛋白分子质量约为50.19 ku,成功构建其原核表达载体并使其在大肠杆菌中得到高效表达.
关键词:山葡萄山葡萄类黄酮-3-O-葡萄糖基转移酶基因实时荧光定量原核表达
分类号:S663.1(果树园艺)
资助基金:国家自然科学基金(31260067)吉林省教育厅十三五科学技术研究项目(2016)
论文发表日期:2018-01-01
在线出版日期:2026-09-12(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 95-98 )
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河南农业科学

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北大核心CSTPCD
ISSN:1004-3268
年,卷(期):2018,47(11)
所属栏目:园艺